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• 激發(fā)光的吸收：
  
  
  • 熒光物質(zhì)（也稱熒光染料或熒光探針）首先吸收一個(gè)特定波長(zhǎng)的光（通常是紫外光或可見(jiàn)光），這一過(guò)程叫做激發(fā)。
  • 激發(fā)光源通常是激光或高強(qiáng)度光源，能夠提供足夠的能量使熒光物質(zhì)從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)。
    
• 非輻射弛豫：
  
  
  • 在激發(fā)光的作用下，熒光物質(zhì)的電子從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)。但是，這個(gè)過(guò)程并不完全是能量的釋放，一部分能量會(huì)以熱的形式消耗掉，這個(gè)過(guò)程叫做非輻射弛豫。
    
• 熒光發(fā)射：
  
  
  • 熒光物質(zhì)在激發(fā)態(tài)停留一段時(shí)間后，會(huì)通過(guò)發(fā)射光的方式返回到基態(tài)，這一過(guò)程稱為熒光發(fā)射。
  • 熒光發(fā)射的波長(zhǎng)通常比激發(fā)光的波長(zhǎng)要長(zhǎng)（即能量較低），這是因?yàn)橐徊糠帜芰恳呀?jīng)在非輻射弛豫過(guò)程中被消耗掉。
  • 發(fā)射光的波長(zhǎng)和強(qiáng)度與物質(zhì)的性質(zhì)、濃度、激發(fā)光的波長(zhǎng)以及實(shí)驗(yàn)條件等有關(guān)。
    
• 熒光光譜的測(cè)量：
  
  
  • 熒光檢測(cè)器通常包括光源、樣品池、光譜分光器、光電探測(cè)器等組成。激發(fā)光通過(guò)樣品時(shí)，物質(zhì)會(huì)發(fā)射熒光，發(fā)射光通過(guò)分光器被分離出來(lái)，最后被探測(cè)器（通常是光電二極管或光電倍增管）接收。
  • 測(cè)量熒光信號(hào)的波長(zhǎng)和強(qiáng)度，可以得到樣品中熒光物質(zhì)的濃度信息。
    

• 高靈敏度：熒光檢測(cè)通常比吸收光譜法更為靈敏，尤其適用于濃度較低的分析。
• 高選擇性：通過(guò)選擇特定的激發(fā)光和發(fā)射光波長(zhǎng)，可以選擇性地檢測(cè)目標(biāo)物質(zhì)，減少干擾。
• 快速分析：熒光信號(hào)的響應(yīng)速度快，適合實(shí)時(shí)分析。
  

• 化學(xué)分析：檢測(cè)各種化學(xué)物質(zhì)，特別是一些具有天然熒光性質(zhì)的化合物或被熒光探針標(biāo)記的物質(zhì)。
• 生物醫(yī)學(xué)：用于檢測(cè)蛋白質(zhì)、DNA、RNA、細(xì)胞及生物分子的含量，或用于追蹤標(biāo)記的生物分子。
• 環(huán)境監(jiān)測(cè)：例如，監(jiān)測(cè)水中有毒物質(zhì)、重金屬、農(nóng)藥殘留等。
• 食品安全：用于檢測(cè)食品中的污染物或添加劑。
• 藥物分析：用于藥物的定量分析以及藥物的代謝過(guò)程研究。
  

• 綠色熒光蛋白（GFP）：常用于生物標(biāo)記和熒光成像。
• 熒光染料：如羅丹明、熒光素等，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞標(biāo)記和分析。
• 金屬離子探針：用于檢測(cè)水樣或環(huán)境中金屬離子的含量